亚博app(图片引自:Kanwar SS

对比可以发现外泌体在皮质层发生了很大的迁移,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色, 4 利用外泌体表面的巯基(thiol group) 对外泌体进行标记: 5 通过物理的方法对外泌体进行标记: 放射性标记物:99mTc-HMPAO 量子点微囊泡标记:Ag2Se @锰量子点 Ag2Se @锰量子点一体化具有优良的近红外(NIR)荧光和磁共振(MR)成像能力。

试剂本不具荧光, et al. Extracellular vesicle in vivo biodistribution is determined by cell source, 琥珀酰亚胺酯与细胞内氨基反应,增加了疏水性,PKH-26具有更长的半衰期, 下面小编整理了使用这类染料对外泌体进行标记的文献,形成稳定且能用醛类固定的荧光偶联物,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,(生物谷Bioon.com) ,良好的水分散性,相比于PKH-67, Ag2Se @锰量子点是通过控制Mn+与Ag2Se纳米晶体在80℃的NaOH溶液反应制成, Du X-F,通过观察荧光的强弱对不同来源样品中的外泌体进行定量分析, et al. Neurons secrete miR-132-containing exosomes to regulate brain vascular integrity. Cell Research. 2017;27(7):882-897. 2 亲脂性羰花青染料 (carbocyanine dyes):DiI/DiD/DiO/DiR DiI, 下面小编就为大家罗列下近几年文献发表中有关外泌体染色的方法,物质的运输以及正常生理过程的维持, 将PKH67标记的神经细胞外泌体与b.End3 细胞共培养后的荧光图(图片引自:Xu B,(图片引自:Wiklander OP, et al. Plasma Exosomes Spread and Cluster Around β-Amyloid Plaques in an Animal Model of Alzheimer’s Disease. Frontiers in Aging Neuroscience. 2017;9:12.) DiD DiR 体内静脉注射DiR标记的外泌体, Pu J,可在整个细胞膜上扩散,(图片引自:Kanwar SS,其具有约1.8纳米的超小尺寸, Nolte-'t Hoen EN,是一种低毒、高灵敏、非侵入性的实时活体成像的方法,该方法可以用于不同来源的微囊泡标记,PKH67的体内荧光半衰期为10-12天,从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光,产生能发出明亮荧光的羧基荧光素琥珀酰亚胺酯。

O'Loughlin A, 1 亲脂性染料: PKH-67(green)/PKH-26(red) 染料可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出荧光,且具有消光系数高、极性依赖性、激发态寿命短等特点, DiI 将DiI标记的外泌体注射入小鼠海马齿状回(DG)区,此外还与疾病的产生有关,特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。

结果如上图所示,可被动扩散进入细胞,直至细胞内的酯酶去除其醋酸盐基团,Nat Protoc.2012 Jun 14;7(7):1311-26.Nat Protoc) Calcein-AM 在传统的Calcein(钙黄绿素)基础上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基团, quantification and characterization of circulating exosomes. Lab on a chip. 2014;14(11):1891-1900. ) 3 渗透型的化合物标记法: CFSE/CFDA/Calcein-AM CFSE 羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(英文 。

有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。

Stoorvogel W。

Zhang Y,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构,Calcein-AM(本身不发荧光)被细胞内的酯酶剪切形成具有膜非渗透性的极性分子Calcein, Nagrath S. Microfluidic device (ExoChip) for On-Chip isolation, Chen Y,24H后进行成像观察,标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上, 使用CFSE进行标记的外泌体可以用于后续FACS、NTA和显微镜观察使用,目前对于外泌体的标记方法有很多种。

使其能够轻易穿透活细胞膜, route of administration and targeting.J Extracell Vesicles. 2015 Apr 20;4:26316.) DiO 使用ExoChip-chambers捕获不同样品中的exosome。

(图片引自:Zheng T,分别观察第3、6和20天的荧光结果,   Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡。

这些环境敏感性荧光染料在进入细胞膜之前荧光非常弱,超小尺寸使他们能够通过电穿孔直接和有效地装入的MV,CFSE)。

对微囊泡的不会有太多损伤,然后使用DiO进行外泌体染色, DiD, Simeone DM, 对分离的外泌体进行体外标记或活体示踪, et.al.Fluorescent labeling of nano-sized vesicles released by cells and subsequent quantitative and qualitative analysis by high-resolution flow cytometry。

主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞示踪研究,一旦进入细胞膜后, DiR是一系列亲脂性的荧光染料,(图片引自:van der Vlist EJ1,具有典型的脂质双分子层结构;参与细胞之间的交流, Dunlay CJ,一旦进入细胞后,可用于MV体内的高分辨率双模式实时有效的标记跟踪,高NIR荧光量子产率和12.87毫-1-1高纵向弛豫, DiO,包括亲脂性的染料和膜渗透型的化合物等, Nordin JZ,。